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rnaimax转染试剂说明书;rnaimax转染试剂说明书赛默飞

时间:2024-06-11 04:08 点击:143 次

rnaimax转染试剂说明书;rnaimax转染试剂说明书赛默飞

RNAiMAX 转染试剂是一种高效的试剂,用于将 RNA 干扰 (RNAi) 分子转染到各种哺乳动物细胞系中。它由赛默飞世尔科技公司生产,以其出色的转染效率、低细胞毒性和广泛的细胞适应性而闻名。

本说明书将详细介绍 RNAiMAX 转染试剂的成分、原理、使用方法和注意事项,帮助研究人员成功地进行 RNAi 实验。

RNAiMAX 转染试剂的成分

RNAiMAX 转染试剂由以下成分组成:

- 阳离子脂质体:这些脂质体带正电荷,与带负电荷的 RNA 分子相互作用,形成脂质体复合物。 - 聚乙二醇 (PEG): PEG 聚合物的加入可以稳定脂质体复合物,延长其在细胞培养液中的循环时间。 - 缓冲液:缓冲液提供了最佳的 pH 值和离子强度,以促进脂质体复合物与细胞膜的相互作用。 转染原理

RNAiMAX 转染试剂采用脂质体介导的转染原理。脂质体复合物首先与细胞膜相互作用,形成内吞小泡。然后,小泡与细胞内体融合,释放脂质体复合物。脂质体复合物随后与内质网融合,释放 RNA 分子进入细胞质。

一、呼吸之窗,生命之源

这些副作用通常是轻微的,并且在几天内就会消失。如果您遇到任何这些副作用,请告诉您的医生。他们可以建议如何减轻副作用或改变治疗方案。

乙肝疫苗的锋利利刃:叩开免疫大门的注意事项

乙肝疫苗通常是安全的,但可能会引起轻微的副作用,包括:

使用方法 细胞准备

将细胞接种到适当的培养基中,并培养至 70-80% 的汇合度。

复合物制备

1. 在无血清培养基中稀释 siRNA 或 plasmid DNA。 2. 根据厂家的说明书,向稀释的核酸溶液中加入 RNAiMAX 转染试剂。 3. 孵育 20 分钟,形成脂质体复合物。

转染

1. 除去细胞培养基,用无血清培养基冲洗细胞两次。 2. 将脂质体复合物添加到细胞培养基中,并轻轻混匀。 3. 孵育 4-6 小时,或根据实验要求的时间。 4. 根据需要更换含有血清的培养基。

优化建议

为了优化转染效率,建议遵循以下建议:

- 使用高转染效率的细胞系:HEK293、HeLa 和 COS-7 等细胞系通常具有高的转染效率。 - 优化核酸浓度:确定最佳的 siRNA 或 plasmid DNA 浓度进行转染。 - 优化 RNAiMAX 转染试剂浓度:根据厂家的说明调整 RNAiMAX 转染试剂的用量。 - 使用无血清培养基:血清中的蛋白质可能会与脂质体复合物相互作用,降低转染效率。 - 温和处理细胞:避免过度吹打或涡旋细胞,这可能会破坏脂质体复合物。 注意事项

使用 RNAiMAX 转染试剂时,需要注意以下事项:

- 细胞毒性:高浓度的 RNAiMAX 转染试剂可能会导致细胞毒性。建议根据厂家的说明使用推荐的浓度。 - 非特异性效应:siRNA 可能会非特异性地抑制具有相似序列的 mRNA。仔细设计 siRNA 序列非常重要。 - 免疫原性:脂质体复合物可能具有免疫原性,这可能会影响转染效率。对于长期实验,建议在培养基中加入抗生素。 应用

RNAiMAX 转染试剂广泛用于各种 RNAi 实验,包括:

- 基因敲除: siRNA 可用于敲除特定基因的表达。 - 基因过表达: plasmid DNA 可用于过表达特定基因。 - 功能研究: RNAi 可用于研究基因的功能和信号通路。 - 药物筛选: RNAi 可用于筛选针对特定靶标的药物。

RNAiMAX 转染试剂是一种高效且通用的试剂,用于将 RNA 分子转染到哺乳动物细胞系中。它易于使用,并且适用于广泛的细胞类型。通过优化转染条件和注意安全注意事项,研究人员可以利用 RNAiMAX 转染试剂成功地进行 RNAi 实验,揭示基因的功能并推进生物学研究。

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